Characterization of the molecular mechanisms involved in autolysin/adhesin-mediated staphylococcal adherence and internalization

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Description

Staphylococcus aureus ist der Erreger verschiedener schwerer Infektionen beim Menschen wie Endokarditis und Sepsis. Die Kolonisation des Wirtsgewebes durch S. aureus wird dabei als wichtigster Schritt bei der Initiation der Infektion angesehen. Bei Staphylokokken ist kürzlich eine neue Klasse von multifunktionellen Adhäsinen beschrieben worden: die Autolysin/ Adhäsine. Zu diesen zählen bei S. aureus Atl und das von uns charakterisierte Aaa. Beide Proteine besitzen neben Adhäsions-Eigenschaften auch bakteriolytische Aktivität. Ziel des beantragten Projektes ist, die Rolle von Aaa und Atl bei der S. aureus Gewebekolonisation zu charakterisieren. Dazu soll zunächst zu der bereits vorhandenen aaa-Mutante eine atl- Mutante und eine aaa/atl-Doppelmutante konstruiert werden. Die Mutanten sollen in Adhäsions- Assays in Zellkultur sowie in vivo in einem Maus-Nasenkolonisationsmodell charakterisiert werden. Weiterhin sollen die Bindungsdomänen in Aaa und Atl identifiziert werden. Da dem Mechanismus der Bindung von Aaa und Atl an die S. aureus Zellwand möglicherweise eine zentrale Bedeutung bei der Adhäsion zukommt, soll dieser aufgeklärt werden. Durch Promotorfusionen mit einem Reportergen soll die Regulation der Expression von aaa und atl in vitro sowie in vivo analysiert werden. Langfristig ist geplant, Aaa und Atl gezielt auf ihre Eignung zur Vakzin-Entwicklung zu untersuchen. Mit den hier gewonnenen Erkenntnissen hoffen wir, neue Konzepte zur Prävention bzw. Therapie der invasiven S. aureus Infektionen entwickeln zu können.