Antisense-Oligonukleotide zur Therapie der Mukoviszidose: Inhibition der ENaC-vermittelten Natriumabsorption in humanen Nasenepithelzellen

Sobczak Katja, Bangel-Ruland Nadine, Semmler Judith, Lindemann Herman, Heerman Ralf, Weber Wolf-Michael

Zusammenfassung

Hintergrund. Der Erbkrankheit Mukoviszidose(„cystic fibrosis“, CF) liegt neben einer reduzierten Chloridsekretion über den „cystic fibrosis transmembrane conductance regulator“(CFTR) auch eine Na+-Hyperabsorption über den amiloridsensitiven epithelialen Na+-Kanal (ENaC) zugrunde. Mutationen des CFTR sind ursächlich für die Bildung eines zähflüssigenMukus und eine gestörte mukoziliäre Reinigung im respiratorischen Trakt.Material und Methoden. Innerhalb dieses Projekts sollte die Inhibierung der Na+-Hyperabsorptiondurch Antisense-Oligonukleotide (AON) erreicht werden. Für funktionale Untersuchungenwurden Monolayer humaner Nicht-CF- und CF-Nasenepithelzellen mittels Ussing-Kammer-Messungen analysiert. Zur Charakterisierung der AON-Wirkung auf Proteinebenewurden Western-Blot-Analysen durchgeführt.Ergebnisse. Die AON-Transfektion verringertedie Na+-Absorption über den ENaC in Nicht-CF- und in CF-Zellen deutlich. Außerdemzeigten Western-Blot-Analysen eine Reduzierungdes ENaC-Proteins in den mit AON-transfizierten Nicht-CF-Zellen.Schlussfolgerung. Die Reduktion der ENaC-vermittelten Na+-Absorption mit spezifischen AON eröffnet eine neue Perspektive, die krankhafte Na+-Hyperabsorption bei CF-Patientengezielt zu regulieren.